Загрязнение колонки

Одной из возможных причин неисправности колонки может стать очень прочное удерживание на привитой фазе отдельных компонентов пробы или подвижной фазы. Это приводит к ухудшению разрешения и изменению времен удерживания пиков. Это также может пагубно влиять на форму пиков. Механические примеси и выпавшие в осадок компоненты пробы или соли буферных растворов также могут испортить колонку, забивая входной фрит или сорбент.

    Причины:
  • Проба содержит компоненты, несмывающиеся с колонок подвижной фазой данного состава. Это часто наблюдается при использовании подвижных фаз с малым содержанием органического компонента.
  • Примеси в подвижной фазе адсорбируются на неподвижной фазе колонки. Это часто происходит при использовании ион-парных реагентов или других добавок в сочетании с подвижной фазой с малым содержанием органической составляющей и изократическим режимом элюирования.
  • Механические примеси в пробе или подвижной фазе, забивающие входной фрит колонки.

Предотвращение: Очистка образца перед инжекцией, подразумевающая фильтрацию или центрифугирование образца для удаления механических примесей и твердофазную экстракцию для удаления высоко удерживаемых компонентов пробы. Используйте только особо чистые растворители и реактивы для подвижной фазы и не забывайте фильтровать буферные растворы. По возможности откажитесь от ион-парных реагентов. В качестве ион-парных реагентов при работе на обращенной фазе не используйте вещества, содержащие в углеродных цепях более восьми атомов углерода. Для того, чтобы смыть высокоудерживаемые примеси с неподвижной фазы колонки, промойте ее в течении продолжительного времени сильным растворителем (таким, как 100% ацетонитрил). Поместите в линию между инжектором и колонкой предколонку, которая будет адсорбировать несмывающиеся компоненты и защищать аналитическую колонку. Не забывайте своевременно менять предколонку.