Потеря химически привитой фазы

В настоящее время около 90% всех анализов ВЭЖХ выполняются на химически привитых фазах, главным образом фазах с привитыми алкильными группами (обращенных). Разрушение химических связей между привитыми группами и силикагельной матрицей приводит к изменению времен удерживания и разрешения, а также к тому, что пики "хвостят".

Причина: гидролиз силоксановых связей силикагелевой матрицы с привитыми группами или эндкэпирующим реагентом, применяемым для устранения влияния остаточных силанольных групп на поверхности силикагеля. Гидролиз наиболее выражен при использовании подвижных фаз с pH меньше 3-х.

Предотвращение: при необходимости применения сильнокислых подвижных фаз (pH меньше 3-х) следует использовать специально предназначенные для этого колонки (в том числе и с силикагельной матрицей). Данные изделия способны стабильно работать в диапазоне pH 1,5 - 10. Обычные же колонки допускают работу с подвижными фазами, pH которых лежит в диапазоне 3 - 7. При работе вблизи нижней границы данного диапазона избегайте температур подвижной фазы выше 60 градусов Цельсия.